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黃原膠搖瓶發酵條件的優化研究

發布日期:2015-06-07 10:34:56
黃原膠是以玉米淀粉為主要原料,由野油菜黃單胞菌或甘藍黑腐病黃單胞菌發酵而產生的一種微生 物胞外多糖 .它是一種生物高分子聚合物,由D-葡萄糖、D-甘露糖、D-葡萄糖酸、乙酸和丙酮所組成的 “五糖重復單位”聚合而成[2].因為黃原膠液具有懸浮性、假塑性、食用安全性和良好的配伍性,所以被廣泛 地運用到食品、醫藥、化妝品、鉆井和陶瓷等行業[3,].黃原膠成品粘度高低是評價黃原膠品質好壞的重要 指標之一,黃原膠成品粘度的高低與發酵時的溫度,pH,CaCO3添加量,搖瓶裝液量,培養基組成以及后處 理等諸多因素有直接或間接關系[5,],作者在實際生產中研究了發酵條件對黃原膠的產量和成品粘度的 影響.
1材料與方法
1.1菌種
甘藍黑腐病黃單胞囷ZZ-1(Xanthomonos campestris ZZ-1),為河南天冠集團實驗中心誘變囷種.
1.2培養基
1.2.1固體斜面培養基蔗糖20 g,牛肉膏3 g,酵母膏1 g,蛋白胨6 g,瓊脂15 g,水1 000 mL,pH7.2. 1.2.2種子培養基蔗糖20 g,牛肉膏3 g,酵母膏1 g,蛋白胨6 g,水1 000 mL,pH7.2.
1.2.3發酵培養基玉米淀粉 45 g,蛋白胨 4 g, MgSO4.7H2O 0.02 g, K2HPO4 1 g,水 1 000 mL.
1.3優化方法
將培養的基本條件定為培養基發酵的起始條件,即溫度30 °C,pH 7, CaCO3添加量為0%,三角瓶裝料 量為20%和搖床轉速200 •mm-1,在其它條件不變的情況下,改變其中一個條件,測定其所產黃原膠的成 品粘度,并與基本條件下發酵生產的黃原膠成品粘度進行比較.
1.4成品粘度測定方法
取成品黃原膠1 g,KCl 1 g,溶于98 g蒸餾水中,用機械攪拌裝置攪拌1 h,采用NDJ-1型旋轉粘度計, 用3號轉子于25 C下進行測定,轉速為60 •min-1.
2結果與分析
從圖1和圖2可以看出,培養基的起始pH值和CaCO3的添加量對發酵成品粘度有一定的影響.起始 pH值和CaCO3的添加量分別在7.2和0.30%時成品粘度較高,黃原膠質量較好.
黃原膠中丙酮酸含量的高低直接影響成品的粘度高低[7].由于在黃原膠發酵過程中有乙酸和丙酮酸 生成,因此pH值呈下降趨勢.當pH值下降到一定程度時,不但會抑制黃單胞菌丙酮酸生成的代謝途徑, 還會嚴重影響黃單胞菌的生長繁殖,還必須添加適量的CaCO3起緩沖作用.當發酵液的pH值過高時,雖 然有利于丙酮酸的生成,但是嚴重影響了發酵期黃單胞菌的大量繁殖.因此,發酵液的起始pH應保持中 性偏堿.
2.2發酵溫度對成品粘度的影響
在其它條件一定的情況下,改變搖瓶發酵的溫度進行實驗,所得結果見圖3,從圖3可以看出,黃原膠 發酵的最適溫度應為30 C.在該溫度下較對照29 C有顯著提高.
2.3裝料量對成品粘度的影響
在其它條件一定的情況下,改變搖瓶發酵的裝料量(裝料系數依次為15%,20%,25%,30%,35%, 40%),測定其對黃原膠發酵的影響(圖4).
從圖4可以看出,隨著三角瓶裝料量的增加,成品粘度逐漸下降,主要是因為隨著裝料量的增加,發酵 液中的溶氧已不能滿足發酵的需要.黃原膠的發酵屬好氧發酵,其發酵液中溶氧越多,越有利于黃原膠中 丙酮酸的生成,導致成品的粘度也越高.而通過改變搖瓶裝料量可有效地改變發酵過程中的溶氧,所以黃 原膠生產中必須通過加大通風量來提高溶氧.雖然15%的裝料量成品粘度要高于20%的裝料量,但考慮 到生產實際,選擇20%作為最佳裝料量.
圖4搖瓶裝料量對成品粘度的影響
圖3培養溫度對成品粘度的影響
2.4優化培養條件與基本培養條件的比較
從上述結果可以看出,在pH 7.2, CaC〇3 0.30%,培養溫度30 °C,搖瓶裝料量為20%的條件下對黃原 膠產膠發酵比較有利,與基本發酵條件對比的試驗結果見表1.
從表1可以看出,2種培養條件下,
表1最適培養條件與基本培養條件下成品粘度的比較
培養條件溫度/CCaCO3/ %裝料量/%pH值成品粘度/cp
優化300.30207.21 410
基本290.00207.01 210
成品黃原膠的粘度差別比較大,用優化 條件進行發酵可將成品黃原膠的粘度提 高 16.53%.
3小結與討論
1)通過實驗,得到了黃原膠搖瓶發 酵的優化條件為pH 7.2, CaCO3 0.30%,培養溫度30 °C,搖瓶裝料量為20%,在此條件下進行發酵與基本 條件相對比,差異比較顯著.
2)黃原膠的成品粘度不僅與發酵條件有關,還與培養基組成、碳源選擇等有關,這方面還有待進一步 研究,不過由于黃原膠的成品粘度與發酵終了粘度不呈正相關關系,因此,直接研究發酵條件對黃原膠成 品粘度的影響更具有實際意義.